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抗體的選擇和保存指南
點擊次數:71 發布時間:2020-07-15

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    今天給大家分享一篇關于抗體的選擇與保存,搬起小板凳快來圍觀吧!

    一、抗體的穩定性
    1. 抗體的穩定性是自然界長期進化的結果??贵w是免疫系統中最重要的分子之一,其穩定性是自然進化篩選的結果。在眾多物種中,抗體分子形成了保守而穩定的結構。
    2. 抗體分子的高Tm值。在室溫下,甚至短時間溫度達到50-60℃,抗體分子都能維持正確折疊,保持應有的活性。
    3. 抗體的純度。采用先進的抗體純化技術,確??贵w產品的高純度,保障其抗體產品的穩定性。
    4. 抗體的濃度。高濃度的抗體產品可減少容器表面吸附造成的物質損失,高濃度的抗體穩定性更好,抗體產品中93%的濃度大于0.5mg/ml。
 
    二、怎樣確定抗體購買渠道和品牌?
    國外著名抗體品牌的質量一般沒問題,但價格較貴,而且很多抗體品牌本身不生產抗體,所以能找到OEM抗體生產商生產的原裝進口抗體。
 
    三、怎樣保存已獲得的抗體?
    抗體無論是保存還是運輸都應盡可能地避免反復凍融,收到抗體后請根據實驗的需要,對抗體進行分裝,避免同一管抗體反復凍融(反復凍融會導致抗體空間結構變 性,導致多聚體形成,從而降低抗體的結合能力)??贵w保存得當與否,直接決定了抗體的活性和使用效果,如果抗體保存得當,抗體活性大部分都可以維持數年。 請謹記,無論何時請按照說明書推薦的保存條件正確處理和保存抗體。

    1. 收到抗體后,請務必在4℃,12000rpm,離心3分鐘,(無論是液體還是凍干粉狀態),再打開管蓋進行分裝和保存(如果抗體體積小于50ul,請延長 離心時間至5分鐘,以保證全部抗體均離心下來)??贵w一般使用特制的儲存管,只有在12000rpm離心3分鐘,才能將附著在管壁或蓋內的抗體全部離心下 來(即使是在10000rpm離心也會離心不完全,導致出現抗體的量不足的現象)。

    2. 對于ProSci大部分抗體,比較合適的保存方式是,分裝后保存在-20℃或者-80℃。
    (1)對絕大多數抗體來說,保存在-20℃就完全足夠了,沒有任何證據顯示保存在-80℃會更好。
    (2)分裝可以Most程度的降低反復凍融對抗體活性的損害,同時也降低了由于多次從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。
    (3)分裝的量以一次實驗用完為好,最少不能少于10ul每份。因為分裝體積越小,抗體的濃度越可能會受到蒸發以及管壁吸附的影響。
    (4)復融后的分裝抗體如果一次用不完,將剩余母液保存在4℃,避免再凍起來。
    (5)抗體工作液應該當天配制當天用完,4℃保存盡量不要超過1天。
    (6)避免將抗體保存在自動除霜冰箱中,將抗體保存在冰箱里層,避免溫度變化造成反復凍融。
 
    3. 大部分抗體收到后4℃短暫保存1~2周對抗體活性沒有影響。

    4. 大部分抗體的運輸條件:一般的運輸過程需要1~2周的時間,所以是在低溫4℃的條件下來完成的。

    4℃運輸最主要的目的是為了避免反復凍融對抗體活性的損害(如果使用干冰運輸,那么收到時抗體是凍起來的,為了分裝就需要解凍,這就多了一次凍融的過程),所以運輸過程中避免干冰運輸。

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